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技術(shù)文章

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細(xì)胞凍存解決方案細(xì)胞凍存解決方案細(xì)胞凍存步驟：1.預(yù)先配制凍存液：10%DMSO+90%胎牛血清，4℃冰箱保存預(yù)冷；2.用胰酶對(duì)細(xì)胞進(jìn)行消化：倒去培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基或用槍小心吸去培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基，PBS沖洗兩次，用胰酶消化細(xì)胞（盡可能溫和）；3.再次用*培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞，將預(yù)冷的凍存液加入消化*的細(xì)胞中，用滴管輕輕吹打混勻。4.在每支凍存管中加入1ml細(xì)胞液，密封后標(biāo)記凍存細(xì)胞名稱和凍存日期。5.凍存步驟的細(xì)致直接關(guān)系到細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)的活力，如果有程序降溫器（放在-80℃冰箱過(guò)夜，放入液氮罐）；或者...

2015 12-8
神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)基自然篩選法多年的研究使神經(jīng)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)，體外擴(kuò)增等技術(shù)日臻完善?，F(xiàn)在科學(xué)家們已克隆了人體的神經(jīng)干細(xì)胞，并將其在體外培養(yǎng)，擴(kuò)增。zui近，有研究又將人的神經(jīng)干細(xì)胞成功地植入了胚胎鼠腦中，這些干細(xì)胞研究在人體的應(yīng)用，使其從實(shí)驗(yàn)室逐步走向了臨床，為人類神經(jīng)系統(tǒng)疾病的治療提供了一個(gè)全新的視角。神經(jīng)系統(tǒng)疾病的基因?qū)胫委熑缜八?，癌基因轉(zhuǎn)染干細(xì)胞形成的永生細(xì)胞系不僅可以成功地整合于植入部位，而且可以穩(wěn)定地表達(dá)轉(zhuǎn)染的外源性基因，這就為中樞神經(jīng)系統(tǒng)的基因治療提供了一個(gè)性能*的載體。利用溫度敏感性...

2015 10-28
心肌細(xì)胞分化培養(yǎng)基的作用由于人類心臟電生理學(xué)特性，其心肌細(xì)胞的去極化時(shí)程與嚙齒類動(dòng)物差異很大。例如，人心臟生理?xiàng)l件下每分鐘搏動(dòng)60-90次，而小鼠為500-700次，大鼠為300-400次。因此，在小動(dòng)物心肌細(xì)胞模型中發(fā)現(xiàn)的理論，當(dāng)需要進(jìn)一步在驗(yàn)證時(shí)，由于缺失人類心肌系統(tǒng)，只能取用其他大型哺乳動(dòng)物的原代分離心肌細(xì)胞替代。而這些細(xì)胞的來(lái)源都不穩(wěn)定，實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性也無(wú)法保證。由于*的原因，基本沒有可能獲得并培養(yǎng)原代人心肌細(xì)胞，以心肌細(xì)胞為代表的心肌細(xì)胞，是目前和將來(lái)*的人源心肌細(xì)胞來(lái)源。心肌細(xì)胞可以極...

2015 10-27
心肌細(xì)胞培養(yǎng)基的廣泛應(yīng)用心肌細(xì)胞，是目前和將來(lái)*的人源心肌細(xì)胞來(lái)源。由于人類心臟的生化和分子生物學(xué)特性，其心肌細(xì)胞的很多核心功能蛋白與小鼠等模式動(dòng)物不同。例如，小鼠心肌細(xì)胞主要表達(dá)α重鏈肌球蛋白，以適應(yīng)高頻率的搏動(dòng)，而人類心肌細(xì)胞主要表達(dá)β重鏈肌球蛋白，適應(yīng)低頻率的搏動(dòng)。此外，以Ito和Ik為代表的鉀離子通道在不同種屬動(dòng)物及人類心肌細(xì)胞間的表達(dá)和功能差異極大，對(duì)于動(dòng)作電位形成的貢獻(xiàn)也各不相同。傳統(tǒng)研究采用的心肌細(xì)胞,主要是采用從新生或成年動(dòng)物心臟分離獲得的原代心肌細(xì)胞。同時(shí)，此類細(xì)胞還存在:分離技術(shù)...

2015 10-19
干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基有什么優(yōu)缺點(diǎn)干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基和試劑在培育無(wú)脊椎動(dòng)物和哺乳動(dòng)物細(xì)胞來(lái)備置單克隆抗體方面被廣泛的應(yīng)用，還有病毒抗原和重組蛋白等。無(wú)血清培養(yǎng)基是不用增加血清就能夠保持細(xì)胞在體外比較長(zhǎng)時(shí)刻成長(zhǎng)繁衍的組成培養(yǎng)基。大部分的干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基擁有向細(xì)胞中轉(zhuǎn)輸離子的轉(zhuǎn)鐵蛋白和調(diào)理葡萄糖攝取量的胰島素，還有一部分蛋白質(zhì)和清蛋白，纖維蛋白，胎球蛋白等，綜上所指的蛋白在細(xì)胞培育中具有各自不一樣的功用，如供給細(xì)胞貼壁所要的基質(zhì)，抗生物反應(yīng)器剪切力，供給細(xì)胞貼壁所需的基質(zhì)，作為脂類和其他生長(zhǎng)因子的載體等。干細(xì)胞...

2015 8-26
神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)基的作用神經(jīng)干細(xì)胞是具有多潛能性的細(xì)胞，它具有分化成有限細(xì)胞類型和構(gòu)建組織的能力。目前已知，神經(jīng)干細(xì)胞在體外特定的條件下可被誘導(dǎo)分化為神經(jīng)元細(xì)胞、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞。筆者在試驗(yàn)時(shí)曾取小鼠中腦神經(jīng)干細(xì)胞在體外進(jìn)行誘導(dǎo)分化，為證實(shí)其多分化潛能，在撤掉絲裂原并加入血清分化1周后，對(duì)細(xì)胞進(jìn)行免疫組織化學(xué)鑒定，發(fā)現(xiàn)分化的細(xì)胞中有神經(jīng)元特異性烯醇化酶、膠質(zhì)纖維酸性蛋白、和小膠質(zhì)細(xì)胞特異性抗原標(biāo)志Gal-C陽(yáng)性緗胞。此三種細(xì)胞已成為鑒定神經(jīng)干細(xì)胞分化能力的特異性指標(biāo)。目前，神經(jīng)干細(xì)胞的分離...

2015 8-20
心肌細(xì)胞分化培養(yǎng)基的基本成分心肌細(xì)胞又稱心肌纖維，有橫紋，受植物性神經(jīng)支配，屬于有橫紋的不隨意肌，具有興奮收縮的能力。呈短圓柱形，有分支，其細(xì)胞核位于細(xì)胞中央，一般只有一個(gè)。各心肌纖維分支的末端可相互連接構(gòu)成肌纖維網(wǎng)。廣義的心肌細(xì)胞包括組成竇房結(jié)、房?jī)?nèi)束、房室交界部、房室束（即希斯束）和浦肯野纖維等的特殊分化了的心肌細(xì)胞，以及一般的心房肌和心室肌工作細(xì)胞。心肌細(xì)胞分化培養(yǎng)基是人工模擬細(xì)胞在體內(nèi)生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，是提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的物質(zhì)基礎(chǔ)。培養(yǎng)液或培養(yǎng)基的含義幾乎相同，英文都是medium。...

2015 8-4
神經(jīng)干細(xì)胞是怎么分類的神經(jīng)干細(xì)胞是一種終身具有自我更新能力及廣泛分化潛能的細(xì)胞，它處于分化的非終末狀態(tài)，可通過(guò)對(duì)稱或不對(duì)稱分裂生成新的干細(xì)胞和分化潛能逐漸變小的子細(xì)胞，zui終產(chǎn)生中樞神經(jīng)系統(tǒng)的三種主要細(xì)胞，既神經(jīng)元細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞。神經(jīng)干細(xì)胞存在于胚胎神經(jīng)系統(tǒng)及成年腦的某些特定部位，其特征性的生物學(xué)標(biāo)志為神經(jīng)巢蛋白（nestin）。胚胎神經(jīng)干細(xì)胞的分裂增殖分化是神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)生的基礎(chǔ)，成年神經(jīng)系統(tǒng)中干細(xì)胞的功能還不十分明確，一般認(rèn)為它們（尤其是位于海馬區(qū)的干細(xì)胞）很可能與認(rèn)知功能密切...

2015 7-2

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