服務(wù)熱線
400-021-2200
| 品牌 | HY StemCell/華雅干細(xì)胞 |
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產(chǎn)品英文名稱：HY Stemcell CCGmHuM TM Human MSCs Growth Medium
產(chǎn)品中文名稱：人間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基
CCGmHuM 人間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基根據(jù)干細(xì)胞的生長(zhǎng)需要，培養(yǎng)基包含必需和非必需氨基酸、維生素、有機(jī)和無機(jī)化合物、激素、生長(zhǎng)因子、微量礦物質(zhì)、血清替代物以 及其他補(bǔ)給成分。非常適用于培養(yǎng)哺乳類干細(xì)胞，包括臍帶干細(xì)胞，骨髓干細(xì)胞，脂肪干細(xì)胞等 間充質(zhì)干細(xì)胞。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，無病毒和支原體，性能穩(wěn)定，使用 該培養(yǎng)基能使干細(xì)胞在理想營(yíng)養(yǎng)平衡狀態(tài)下進(jìn)行多代擴(kuò)增而不發(fā)生分化（至少10代以內(nèi)）。
人間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基產(chǎn)品特點(diǎn)：
1.Chemically-Defined
2. Serum-Free
3. Xeno-Free
4.No Plate Coating Necessary
5.Perform Better than FBS Medium
HY Stemcell CCGmHuM TM Human MSCs Growth Medium人間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)操作手冊(cè)：
1. 材料和試劑準(zhǔn)備
耗材：細(xì)胞培養(yǎng)瓶 corning cellbind flask
25cm2 flask：corning 3289
75cm2 flask：corning 3290
175cm2 flask：corning 3292
試劑：原代人間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基CCGmHuM Medium（ HZ0201M）：
Basal medium(HZ0202M ,450ml)+Supplement(HZ0203M,50ml)+Adherent factor（HZ0205M ,25X）
*培養(yǎng)基配制：將Supplement在4℃溶解，溶解后將50ml溶液全部加入450ml Basal medium中；原代培養(yǎng)時(shí)需加入1X 的Adherent factor（Adherent factor：*培養(yǎng)基的體積比為1：24比例配制）。
傳代用人間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基CCGmHuM Medium（ HZ0201M）：
Basal medium(HZ0202M ，450ml)+Supplement(HZ0203M ，50ml)
*培養(yǎng)基配制：將Supplement在4℃溶解，溶解后將50ml溶液全部加入450ml Basal medium中。
細(xì)胞分離試劑： TrypLE™ Select CTS™（Gibco-A12859-01，100ml）
2. 方法
原代培養(yǎng)（臍帶來源的MSC）
1.1 制備組織細(xì)胞團(tuán)：用手術(shù)器械剝離臍帶血管獲得華通氏膠體，洗凈血細(xì)胞，制備成1-4mm3組織小團(tuán)塊。
1.2 接種：將組織細(xì)胞團(tuán)塊按5-10mg/cm2均勻接種至細(xì)胞培養(yǎng)瓶中。
1.3 細(xì)胞維持：實(shí)時(shí)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況，適當(dāng)換液，待原代細(xì)胞形成的克隆達(dá)到約100個(gè)細(xì)胞時(shí)，可以進(jìn)行細(xì)胞消化、細(xì)胞凍存或傳代培養(yǎng)。
我們推薦細(xì)胞3-4天換液，原代培養(yǎng)時(shí)間大概為9-13天！
細(xì)胞傳代、擴(kuò)增培養(yǎng)
2.1細(xì)胞消化
待細(xì)胞匯合度約75%-80%左右時(shí)（9-13天左右），棄掉培養(yǎng)基，用DPBS（w/o Ca2+Mg2+）潤(rùn)洗一遍，加入適量的細(xì)胞分離液覆蓋細(xì)胞表面，37度，2-5min。待細(xì)胞開始脫落時(shí)，用適量的*培養(yǎng)基即刻終止消化，細(xì)胞離 心，300 g，8 min，棄去上清，用*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞沉淀。
2.2細(xì)胞傳代
按1.5-4*103/cm2接種到細(xì)胞培養(yǎng)瓶中，放入二氧化碳恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
我們推薦每3天左右進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng)，判定傳代時(shí)間為細(xì)胞在培養(yǎng)
瓶中匯合度約為75%-80%，不能長(zhǎng)得過滿!
如果您在使用CCGmHuM TM Human MSCs Growth Medium 人間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基過程中，有任何技術(shù)問題，我們開通了HY STEMCELL技術(shù)團(tuán)隊(duì)，歡迎您發(fā)郵件到pm@hystemcell.com 進(jìn)行交流溝通，我們的目標(biāo)是：推動(dòng)中國(guó)干細(xì)胞技術(shù)走向產(chǎn)業(yè)和臨床！
產(chǎn)品應(yīng)用領(lǐng)域：
適用于人及哺乳類來源的間充質(zhì)干細(xì)胞或成體干細(xì)胞的培養(yǎng)，包括臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞及脂肪干細(xì)胞